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糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)

价格

¥ 270

  • 规格
    • 5×50mL
    • 5×100mL

所属分类:

糖原类染色

糖原类染色

货  号:

BP-DL034

货  期:

备现货

存储条件:

2-8℃,避光

有  效  期:

6个月

  • 产品描述
  • 参考文献
    • 商品名称: 糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)
    • 商品编号: BP-DL034
    • 货号(表格): BP-DL034
    • 价格(表格): 270/490
    • 规格: 5×50mL/5×100mL
    • 规格(表格,必填): 5×50mL/5×100mL
    • 货期: 备现货
    • 储存条件: 2-8℃,避光
    • 有效期: 6个月
    • 规格:

    货号】 BP-DL034

    【规格】 5×50mL/5×100mL

    【保存】 2~8℃,避光,6个月有效。

    【产品组成】

    Component

    5×50mL

    5×100mL

    Store at

    试剂(A):淀粉酶溶液

    50ml

    100ml

    2~8

    试剂(B):过碘酸溶液

    50ml

    100ml

    2~8℃,避光

    试剂(C):Schiff Reagent

    50ml

    100ml

    2~8℃,避光

    试剂(D):Mayer苏木素染色液

    50ml

    100ml

    2~8℃,避光

    试剂(E):酸性乙醇分化液

    50ml

    100ml

    10~30

    【产品简介】

    糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。PAS技术是唯一可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解,形成水溶性的双糖-麦芽糖,在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段,但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑,不主张应用唾液。

    糖原D-PAS染色液的特点在于糖原PAS染色之前经淀粉酶处理,糖原消化时需要两张相同的切片,脱蜡后一张切片用含有淀粉酶的适当缓冲液处理,另一张仅用缓冲液处理。然后两张切片均用PAS法染色,消化后染色消失表明存在糖原。

    【使用方法】 

    1、两张相同切片,二甲苯脱蜡,梯度乙醇入水。

    2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理,入水中1h作为对照。

    3、流水冲洗两张切片各5~10min。

    4、入过碘酸溶液,室温放置5~8min,一般不宜超过10min。

    5、自来水冲洗1次,再用蒸馏水浸洗2次。

    6、入Schiff  Reagent,置于室温阴暗处浸染10~20min。

    7、自来水冲洗10min。

    8、入Mayer苏木素染色液,染细胞核1~2min。

    9、(可选)酸性乙醇分化液分化2~5s。

    10、自来水冲洗10~15min,更换蒸馏水清洗使其返蓝。

    11、二甲苯透明,中性树胶封固。

    【染色结果】

    糖原、中性,唾液黏蛋白

    红紫色

    各种糖蛋白

    红紫色

    细胞核

    蓝色

    未处理的切片,糖原呈亮红色或红紫色;淀粉酶处理的切片,糖原阴性。

    【注意事项】

    1、切片脱蜡应尽量干冷,否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。

    2、过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时温度以18~22℃最佳。

    3、试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前最好提前取出恢复到在室温后,避光暗处使用。

    4、酸性乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。

    5、在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织类别等决定。

    6、况冶切片染色时间尽量要短。

关键词:

糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法)

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