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22

2024

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03

新细胞推荐——MIN6

作者:


宫崎俊一等人于1990年从靶向表达SV40 T抗原基因的转基因非肥胖糖尿病小鼠中获得的胰岛素瘤细胞,并且建立了两种细胞系MIN6和MIN7。其中MIN6细胞系保留了正常β 细胞的生理特性,可产生胰岛素、胰高血糖素、生长激素释放抑制激素、生长激素释放肽和SV40 T抗原,并具有胰腺β细胞的形态学特征,葡萄糖诱导条件下可分泌与正常小鼠胰岛细胞相当水平的胰岛素,并高水平表达肝型葡萄糖转运体(GT)mRNA。

培养建议

1、部分细胞传代后细胞内出现黑色小点,细胞间隙内出现少量颗粒物或者培养基中浮游着少量死细胞等均为正常现象,对细胞的增殖及试验无影响。

2、细胞外的黑色颗粒大部分是细胞碎片,可以吸去细胞悬液后用PBS进行清洗;如若PBS清洗后未能清除的碎片,可以用胰酶消化细胞重新接种,如果碎片较多,建议用PBS多清洗几遍。

3、细胞传代处理后的第二天,在显微镜下观察细胞状态,如死细胞较多且细胞密度较低,需要进行换液操作,也可视情况稳定。

4、MIN6细胞推荐使用DMEM高糖培养基,含10%胎牛血清,添加50uM β-巯基乙醇(终浓度)培养。巯基乙醇的活性部分是巯氢基,在细胞培养过程中能使血清中含硫的化合物还原成谷胱甘肽,诱导细胞增殖,为非特异性的激活作用,同时避免过氧化物对培养细胞的损害。巯基乙醇能维持细胞形态的稳定,这是MIN6特有的特点。

5、MIN6细胞系细胞理论上可以一直传代培养,但随着代数的增加,细胞的状态会变差,而且一瓶细胞养一个星期不消化换瓶它就很容易细胞死亡或者状态变差。

研究应用

MIN6细胞系是从表达类人猿病毒40大T抗原(受胰岛毒启动子控制)的转基因非肥胖糖尿病小鼠胰岛瘤中建立的,其内分泌功能与胰腺组织非常接近,是研究胰岛细胞功能的理想模型。MIN6细胞系可用于胰腺分泌的研究,β细胞的适宜刺激信号的探索;1型糖尿病发病机制的研究;氧化应激、自噬、游离脂肪酸对2型糖尿病发病的影响;在胰腺移植后发生排斥的机制研究。

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