%{tishi_zhanwei}%

新闻中心

News Center


了解生航实时动态


05

2024

-

01

HUVEC细胞培养建议

作者:


1.注意此细胞为SV40病毒转染构建的永生化细胞,细胞需要使用ECM专用的培养基,建议查找ECM专用培养基购买使用,配套有血清和生长因子;
2.到货细胞复苏长满后1:4-1:6传代,细胞传代时密度不能太高;
3.如果无特殊实验需求,建议对细胞进行保种留存,即每次都1:6传代,即需要1个T25瓶传6个T25瓶,细胞再次长满T25瓶后,冻存保种5瓶,留一瓶继续1:6传代培养;
4.细胞培养过程中,需要每两天弃掉旧的培养基清洗并更换新的培养基,换液频率要维持此水平,以保证细胞的正常扩增。
5.细胞贴壁不牢,注意严格控制消化时间,切忌消化过头。
6.终止消化尽量单独配置DMEM/F12+10%FBS或DMEM+10%FBS完培,不能直接使用ECM培养基;
7.1ml 0.25%的EDTA胰酶对应3ml的培养基来终止消化会比较彻底不会残留胰酶刺激细胞膜。
8.注意此细胞不能擅自更换除ECM专用培养基以外的其他培养体系,更换导致的细胞问题,不予售后; 
9.细胞培养环境:将细胞培养在37℃、5% CO2和95%相对湿度的环境中,以提供适宜的生长条件。
10.传代和传代培养:当细胞生长到80%汇合度时,可以进行传代。使用0.25%的胰蛋白酶消化细胞,并按照推荐的比例进行传代培养。
11.细胞换液:在培养过程中,根据需要更换新鲜的完全培养基,以清除代谢产物和维持细胞生长。
12.观察和记录:定期观察细胞的生长状态和形态,并记录相关信息。如果发现细胞出现异常,及时采取措施进行处理。
13.注意事项:在进行HUVEC细胞培养时,需要注意以下几点:
避免使用未经推荐的试剂和药物,以免对细胞造成损害。
保持培养环境的清洁和无菌,防止污染。
在操作过程中,要遵循无菌原则。

14.HUVEC的原代细胞形体偏向于较为规整的鹅卵石样的铺路石状态;
15.我们HUVEC的细胞为SV40转染的有限代次的传代细胞系,目前传代细胞系的培养图片如上图所示,细胞在密度较低时偏向于长一点细胞,要注意每两天换液清洗一次,保证细胞形态;
16.细胞汇合度较高时接近于原代细胞的铺路石状态,此时需要及时传代,传代比例1:4-1:6传代,HUVEC细胞在培养过程中可传代10-15代之间,要注意及时保留细胞种子,以免代次过高;

相关新闻

实验相关 | 细胞转染试剂怎么选?

2024-04-12

生航生物:细胞培养攻略——HK-2

2024-04-03

新细胞推荐——MIN6

2024-03-22

开学啦,这些细胞常见问题你遇到了吗?

2024-03-14