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RIPA裂解液(中,含抑制剂)

价格

¥ 220

  • 规格
    • 100mL

所属分类:

蛋白提取

蛋白提取

货  号:

BI-WB011

货  期:

查询

存储条件:

一20℃

有  效  期:

12个月

  • 产品描述
  • 参考文献
    • 商品名称: RIPA裂解液(中,含抑制剂)
    • 商品编号: BI-WB011
    • 货号(表格): BI-WB011
    • 价格(表格): 220
    • 规格: 100mL
    • 规格(表格,必填): 100mL
    • 货期: 查询
    • 储存条件: 一20℃
    • 有效期: 12个月
    • 规格:

    【货号】 BI-WB011

    【规格】 100mL / 10mL

    【保存】 -20℃,12个月

    【产品简介】

    RIPA裂解液(中,含抑制剂)是一种常用的细胞组织快速裂解液,主要成分为50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.5% 脱氧胆酸钠, 0.1% SDS,以及正钒酸钠,氟化钠,EDTA,亮肽素等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP和ELISA等。

    【使用方法】

    对于培养细胞样品:

    1、融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,根据需要自行确定添加适当的抑制剂或不添加抑制剂。

    2、对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照6孔板每孔加入150~250μL裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。

    对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150~250μL裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50~100万细胞/管,然后再裂解。

    3、充分裂解后,10000~14000g离心3~5min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入150μL裂解液即可,但如果细胞密度非常高可以适当加量到200μL或250μL。每100万细胞用100μL本产品裂解后获得的上清,其蛋白浓度约为2~4mg/ml,不同细胞有所不同。

    对于组织样品:

    1、把组织剪切成细小的碎片。

    2、融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,根据需要自行确定添加适当的抑制剂或不添加抑制剂。

    3、按照每20mg组织加入150~250μL裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)

     4、用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。

    5、充分裂解后,10000~14000g离心3~5min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。每20mg冻存的小鼠肝脏组织用200μL本裂解液裂解后获得的上清,其蛋白浓度约为15~25mg/ml,不同状态的不同组织有所不同。

    6、如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

    【注意事项】

    1、裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。

    2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

关键词:

RIPA裂解液(中,含抑制剂)

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