产品中心
PRODUCTS CENTER
- 产品描述
- 适用范围
- 验证数据
- 参考文献
- COA
-
- 商品名称: NP-40裂解液（含抑制剂）
- 商品编号: BI-WB007
- 货号（表格）: BI-WB007
- 价格（表格）: 220
- 规格: 100mL
- 规格（表格，必填）: 100mL
- 货期: 查询
- 储存条件: 一20℃
- 有效期: 12个月
【货号】 BI-WB007
【规格】 100mL
【保存】 -20℃ , 12 个月。
【产品简介】
NP-40 裂解液（含抑制剂）是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 PAGE 、Western 、免疫沉淀（immunol precipitation ，IP） 、免疫共沉淀（co-IP）和 ELISA 等。
本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌样品。
NP-40 裂解液（含抑制剂） 的主要成分为 50mM Tris（pH7.4） ，150mM 氯化钠，1% NP-40 以及焦磷酸钠， β-甘油磷酸酯，正钒酸钠，氟化钠，EDTA ，亮肽素等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
【使用方法】
一、对于培养细胞样品：
（一） 融解 NP-40 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM ，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
（二） 对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS 、生理盐水或无血清培养液洗一遍（如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗）。按照6 孔板每孔加入 150~250 μL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触动物细胞 1~2 s 后，
细胞就会被裂解。植物细胞宜在上裂解 2~ 10min。
（三）对于悬浮细胞：离心收集细胞，轻轻 vortex 或者弹击管底以把细胞尽量分散开。按照 6 孔板每孔细胞加入 150~250 μL 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50~ 100 万细胞/ 管，然后再裂解。
四）对于细菌或酵母：对于 1mL 菌液或酵母液，离心去上清，如果有必要可以使用PBS 洗涤一次，充分去除液体后，轻轻 vortex 或者弹击管底以把细菌或酵母尽量弹散。加入 100~200 μL 裂解液，轻轻 vortex 或者弹击管底以混匀，冰上裂解 2~ 10min 。如果希望获得更好的裂解效果，细菌和酵母可以分别使用溶菌酶和破壁酶（Lyticase）消化，然后再使用本裂解液进行裂解。
（五）裂解液用量说明：通常 6 孔板每孔细胞或者 1mL 的菌液或酵母液中的细菌和酵母量加入 150μL 裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到
200 μL 或 250 μL 。每 100 万动物细胞用 100 μL 本产品裂解后获得的上清，其蛋白浓度约为 2~4mg/mL ，不同细胞有所不同。
（六） 充分裂解后，10000~ 14000 g 离心 3~5 min ，取上清，即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
二、对于组织样品：
（一） 把组织剪切成细小的碎片。
（二） 融解 NP-40 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数 min 内加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1 mM ，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
（三） 按照每 20mg 组织加入 150~250 μL 裂解液的比例加入裂解液。（如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用
量。）
（四） 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。也可以把组织样品冷冻后液氮研磨，研磨充分后加入裂解液进行裂解。
（五） 充分裂解后，10000~ 14000 g 离心 3~5 min ，取上清，即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
（六） 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex 使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器或研磨设备，缺点是不如匀浆或研磨那样裂解得比较充分。
【注意事项】
1 、为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2 、需自备 PMSF ，裂解样品的所有步骤都需在冰上或 4ºC 进行
3 、对于某些特殊蛋白的 IP ，若 Western 及 IP 细胞裂解液效果不是非常理想，可以尝试用RIPA 裂解液（强、中或弱）或 NP-40 裂解液。如果 IP 的时候背景很高，则应考虑选用裂解强度较高的裂解液，例如 RIPA 裂解液（强或中） 。如果发现目的蛋白无法被 IP 下来，则说明裂解液的强度过强，可以使用较为温和的裂解液例如 RIPA 裂解液 （弱） 或NP-40 裂解液。
4 、对于某些难溶解蛋白的 Western ，如果发现 Western 及 IP 细胞裂解液 效果不是非常理想，可以尝试使用裂解强度更高的裂解液例如 RIPA 裂解液或 SDS 裂解液。
5 、本产品仅限于科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
6 、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 产品描述
- 适用范围
- 验证数据
- 参考文献
- COA
-
- 商品名称: NP-40裂解液（含抑制剂）
- 商品编号: BI-WB007
- 货号（表格）: BI-WB007
- 价格（表格）: 220
- 规格: 100mL
- 规格（表格，必填）: 100mL
- 货期: 查询
- 储存条件: 一20℃
- 有效期: 12个月
【货号】 BI-WB007
【规格】 100mL
【保存】 -20℃ , 12 个月。
【产品简介】
NP-40 裂解液（含抑制剂）是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 PAGE 、Western 、免疫沉淀（immunol precipitation ，IP） 、免疫共沉淀（co-IP）和 ELISA 等。
本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌样品。
NP-40 裂解液（含抑制剂） 的主要成分为 50mM Tris（pH7.4） ，150mM 氯化钠，1% NP-40 以及焦磷酸钠， β-甘油磷酸酯，正钒酸钠，氟化钠，EDTA ，亮肽素等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
【使用方法】
一、对于培养细胞样品：
（一） 融解 NP-40 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM ，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
（二） 对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS 、生理盐水或无血清培养液洗一遍（如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗）。按照6 孔板每孔加入 150~250 μL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触动物细胞 1~2 s 后，
细胞就会被裂解。植物细胞宜在上裂解 2~ 10min。
（三）对于悬浮细胞：离心收集细胞，轻轻 vortex 或者弹击管底以把细胞尽量分散开。按照 6 孔板每孔细胞加入 150~250 μL 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50~ 100 万细胞/ 管，然后再裂解。
四）对于细菌或酵母：对于 1mL 菌液或酵母液，离心去上清，如果有必要可以使用PBS 洗涤一次，充分去除液体后，轻轻 vortex 或者弹击管底以把细菌或酵母尽量弹散。加入 100~200 μL 裂解液，轻轻 vortex 或者弹击管底以混匀，冰上裂解 2~ 10min 。如果希望获得更好的裂解效果，细菌和酵母可以分别使用溶菌酶和破壁酶（Lyticase）消化，然后再使用本裂解液进行裂解。
（五）裂解液用量说明：通常 6 孔板每孔细胞或者 1mL 的菌液或酵母液中的细菌和酵母量加入 150μL 裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到
200 μL 或 250 μL 。每 100 万动物细胞用 100 μL 本产品裂解后获得的上清，其蛋白浓度约为 2~4mg/mL ，不同细胞有所不同。
（六） 充分裂解后，10000~ 14000 g 离心 3~5 min ，取上清，即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
二、对于组织样品：
（一） 把组织剪切成细小的碎片。
（二） 融解 NP-40 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数 min 内加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1 mM ，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
（三） 按照每 20mg 组织加入 150~250 μL 裂解液的比例加入裂解液。（如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用
量。）
（四） 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。也可以把组织样品冷冻后液氮研磨，研磨充分后加入裂解液进行裂解。
（五） 充分裂解后，10000~ 14000 g 离心 3~5 min ，取上清，即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
（六） 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex 使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器或研磨设备，缺点是不如匀浆或研磨那样裂解得比较充分。
【注意事项】
1 、为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2 、需自备 PMSF ，裂解样品的所有步骤都需在冰上或 4ºC 进行
3 、对于某些特殊蛋白的 IP ，若 Western 及 IP 细胞裂解液效果不是非常理想，可以尝试用RIPA 裂解液（强、中或弱）或 NP-40 裂解液。如果 IP 的时候背景很高，则应考虑选用裂解强度较高的裂解液，例如 RIPA 裂解液（强或中） 。如果发现目的蛋白无法被 IP 下来，则说明裂解液的强度过强，可以使用较为温和的裂解液例如 RIPA 裂解液 （弱） 或NP-40 裂解液。
4 、对于某些难溶解蛋白的 Western ，如果发现 Western 及 IP 细胞裂解液 效果不是非常理想，可以尝试使用裂解强度更高的裂解液例如 RIPA 裂解液或 SDS 裂解液。
5 、本产品仅限于科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
6 、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
关键词：
NP-40裂解液（含抑制剂）
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- 货号（表格）: BI-WB007
- 价格（表格）: 220
- 规格: 100mL
- 规格（表格，必填）: 100mL
- 货期: 查询
- 储存条件: 一20℃
- 有效期: 12个月
【货号】 BI-WB007
【规格】 100mL
【保存】 -20℃ , 12 个月。
【产品简介】
NP-40 裂解液（含抑制剂）是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 PAGE 、Western 、免疫沉淀（immunol precipitation ，IP） 、免疫共沉淀（co-IP）和 ELISA 等。
本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌样品。
NP-40 裂解液（含抑制剂） 的主要成分为 50mM Tris（pH7.4） ，150mM 氯化钠，1% NP-40 以及焦磷酸钠， β-甘油磷酸酯，正钒酸钠，氟化钠，EDTA ，亮肽素等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
【使用方法】
一、对于培养细胞样品：
（一） 融解 NP-40 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM ，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
（二） 对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS 、生理盐水或无血清培养液洗一遍（如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗）。按照6 孔板每孔加入 150~250 μL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触动物细胞 1~2 s 后，
细胞就会被裂解。植物细胞宜在上裂解 2~ 10min。
（三）对于悬浮细胞：离心收集细胞，轻轻 vortex 或者弹击管底以把细胞尽量分散开。按照 6 孔板每孔细胞加入 150~250 μL 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50~ 100 万细胞/ 管，然后再裂解。
四）对于细菌或酵母：对于 1mL 菌液或酵母液，离心去上清，如果有必要可以使用PBS 洗涤一次，充分去除液体后，轻轻 vortex 或者弹击管底以把细菌或酵母尽量弹散。加入 100~200 μL 裂解液，轻轻 vortex 或者弹击管底以混匀，冰上裂解 2~ 10min 。如果希望获得更好的裂解效果，细菌和酵母可以分别使用溶菌酶和破壁酶（Lyticase）消化，然后再使用本裂解液进行裂解。
（五）裂解液用量说明：通常 6 孔板每孔细胞或者 1mL 的菌液或酵母液中的细菌和酵母量加入 150μL 裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到
200 μL 或 250 μL 。每 100 万动物细胞用 100 μL 本产品裂解后获得的上清，其蛋白浓度约为 2~4mg/mL ，不同细胞有所不同。
（六） 充分裂解后，10000~ 14000 g 离心 3~5 min ，取上清，即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
二、对于组织样品：
（一） 把组织剪切成细小的碎片。
（二） 融解 NP-40 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数 min 内加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1 mM ，或者根据实验需要加入适当的蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物。
（三） 按照每 20mg 组织加入 150~250 μL 裂解液的比例加入裂解液。（如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用
量。）
（四） 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。也可以把组织样品冷冻后液氮研磨，研磨充分后加入裂解液进行裂解。
（五） 充分裂解后，10000~ 14000 g 离心 3~5 min ，取上清，即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
（六） 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex 使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器或研磨设备，缺点是不如匀浆或研磨那样裂解得比较充分。
【注意事项】
1 、为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2 、需自备 PMSF ，裂解样品的所有步骤都需在冰上或 4ºC 进行
3 、对于某些特殊蛋白的 IP ，若 Western 及 IP 细胞裂解液效果不是非常理想，可以尝试用RIPA 裂解液（强、中或弱）或 NP-40 裂解液。如果 IP 的时候背景很高，则应考虑选用裂解强度较高的裂解液，例如 RIPA 裂解液（强或中） 。如果发现目的蛋白无法被 IP 下来，则说明裂解液的强度过强，可以使用较为温和的裂解液例如 RIPA 裂解液 （弱） 或NP-40 裂解液。
4 、对于某些难溶解蛋白的 Western ，如果发现 Western 及 IP 细胞裂解液 效果不是非常理想，可以尝试使用裂解强度更高的裂解液例如 RIPA 裂解液或 SDS 裂解液。
5 、本产品仅限于科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
6 、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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NP-40裂解液（含抑制剂）
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