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MTT溶液(5mg/mL)

价格

¥ 50

  • 规格
    • 10mL
    • 5mL

所属分类:

常规溶液

常规溶液

货  号:

BL-O91

货  期:

现货

存储条件:

—20℃,避光

有  效  期:

12个月

  • 产品描述
  • 参考文献
    • 商品名称: MTT溶液(5mg/mL)
    • 商品编号: BL-O91
    • 货号(表格): BL-O91
    • 价格(表格): 80
    • 规格: 10mL
    • 规格(表格,必填): 10mL
    • 货期: 现货
    • 储存条件: —20℃,避光
    • 有效期: 12个月

    【货号】 BL-O91

    【规格】 5mL / 10mL

    【保存】 -20℃,避光,12个月。

    【产品简介】

    MTT比色法是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT检测原理在于活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色甲瓒并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。在特定溶剂DMSO存在的情况下,甲瓒可以被完全溶解。然后通过酶标仪可以测定波长(490nm或570nm)附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。

    【使用方法】

    1、收集培养至对数生长期的细胞,常规胰蛋白酶消化液消化细胞(悬浮细胞无需消化)。

    2、低速离心,收集细胞沉淀。用培养液重悬细胞沉淀,制备成单细胞悬液,并计数。

    3、细胞接种于96孔培养板,每孔体积 200μl,一般接种密度为3000~10000 /孔。96 孔板边缘用无菌PBS或水填充,同时设置调零孔(培养基、MTT、DMSO),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、DMSO)。

    4、5%CO2,37℃培养细胞至处理结束后,每孔加入 5mg/ml MTT 溶液 20μl,继续培养 4h(若培养液中含能与 MTT 反应的成分,则需要去除培养液并用无菌PBS洗涤 2~3 次后再加入 MTT 溶液)。

    5、终止培养,小心吸去孔内培养液,对于悬浮细胞需要离心后再吸弃培养上清。

    6、每孔加入 150μl 二甲基亚砜(DMSO),置摇床上低速震荡 10min,使结晶充分融解。

    7、选择 490nm 波长,在酶联免疫检测仪上测定各孔的吸光值,并记录结果。

     

     

    【注意事项】

    1、MTT溶液(5mg/ml)尽量减少反复冻融,以免失效,当颜色变为灰绿色时,请勿使用。 

    2、使用96孔板进行检测时,如果细胞培养时间较长,应注意蒸发问题。 

    3、MTT溶液在低温情况下会凝固,使用前请置于室温或20~25℃水浴至全部融解后使用。 

    4、观察甲瓒是否完全溶解,亦可以借助光学显微镜观察。

    5、培养细胞时尽量避免细菌污染。 

    6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

     

关键词:

MTT溶液(5mg/mL)

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