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27

2023

-

07

新品速递——人胆管癌细胞HuCC-T1

作者:


     

【细胞介绍】   

英文名称

HuCC-T1(STR鉴定正确)

中文名称

人胆管癌细胞(STR鉴定正确)

种属

人源

组织来源

胆管,腹水转移

生长特性

贴壁生长

细胞形态

上皮细胞样

传代比例

1:2

换液频率

2~3次/周

培养体系

RPMI-1640+10% FBS+1% P/S

培养条件

5% CO2 ;37℃

冻存条件

冻存液:50%基础培养基+40%FBS+10%DMSO;液氮中长期保存。

【细胞培养注意事项】

1、细胞复苏、传代、冻存等步骤详见说明书。

2、部分细胞传代后细胞内出现黑色小点,细胞间隙内出现少量颗粒物或者培养基中浮游着少量死细胞等均为正常现象,对细胞的增殖及试验无影响。

3、细胞外的黑色颗粒大部分是细胞碎片,可以吸去细胞悬液后用PBS进行清洗;如若PBS清洗后未能清掉的碎片,可以用胰酶消化细胞重新接种,如果碎片较多,建议用PBS多清洗几遍。

4、细胞传代处理后的第二天,在显微镜下观察细胞状态,如死细胞较多且细胞密度较低,需要进行换液操作,也可视情况稳定。

【常见问题】

  1. 如何控制胰酶消化时间?

细胞胰酶消化是培养中一个重要手段,如果消化过度会导致细胞破裂产生碎片黑点,严重的会导致细胞形态改变;消化时间不够则会导致细胞难以洗脱,对后续操作有碍。可以在细胞每消化1分钟后在显微镜下观察,细胞形态变圆亮,轻微晃动瓶底几乎没有粘粘为消化完全,需摸索出适宜的消化时间。

  1. 细胞为何生长不均?

可能是接种时没有铺匀,导致生长不均;接种时铺匀了但是由于在细胞贴壁时移动了培养瓶;培养箱剧烈晃动,培养箱门常开常关;培养基过少没有铺满瓶底;培养瓶摆放不平。解决:将细胞消化下来重新接种。

  1. 购买细胞死亡或存活率不高?

培养体系出错,或者培养基不新鲜血清适应性问题;运输过程中的物流原因,运输时间过长细胞长满后老化,运输过程中剧烈撞击瓶身破裂;复苏过程操作问题,复苏用的血清与冻存的血清不一致导致细胞应激。

  1. 细胞传两代后逐渐死亡的原因

细胞培养体系不适应,没有按照说明书的使用;消化过度对细胞本身造成伤害;传代密度过高或过低,传代密度对于有密度依赖性的细胞至关重要,根据细胞说明书来。

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