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24

2023

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07

细胞系新品速递| HUVEC 人脐静脉血管内皮细胞

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HUVEC细胞基本信息

   人脐静脉内皮细胞( Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC) 是脐静脉的重要构成细胞之一。1984年,HUVEC细胞株由Hiroyoshi Hoshi、Wallace L.Mckeehan从一段长约10-20cm的人正常脐带静脉中获取、建立。SetsukoShioda等人研究发现,HUVEC细胞株18-30代的倍增时间为23.5个小时,2427代的倍增时间为67个小时,27-30代的倍增时间为84个小时,32-34代的倍增时间为100个小时。培养至40代后,细胞形态出现多样化,有些细胞变大或变小,有些细胞出现多核:细胞密度下降、倍增时间延长。最后细胞在第54代停止生长,ATCC的预期寿命也显示在50-60代。2018年,Setsuko Shioda等人发现HUVEC细胞株( passage 31)在贴壁汇合时细胞与细胞之间存在间隙,这与典型的内皮细胞特征有所不同。

HUVEC细胞简历卡

该细胞培养要点及培养建议

1、 该细胞为有限传代细胞系,在体外培养可传20代。请注意代次控制。

2、建议细胞前三次传代中冻存部分细胞,后续遇到问题可重新复苏。

3、部分细胞传代后细胞内出现黑色小点,细胞间隙内出现少量颗粒物或者培养基中浮游着少量死细胞等均为正常现象,对细胞的增殖及试验无影响

4、细胞外的黑色颗粒大部分是细胞碎片,可以吸去细胞悬液后用PBS进行清洗;如若PBS清洗后未能清除的碎片,可以用胰酶消化细胞重新接种,如果碎片较多,建议用PBS多清洗几遍

5、细胞传代处理后的第二天,在显微镜下观察细胞状态,如死细胞较多且细胞密度较低,需要进行换液操作,也可视情况稳定。

6、注意此细胞为SV40病毒转染构建的永生化细胞,细胞需要使用ECM专用的培养基

7、此细胞第一次传代可以1:2,后续尽量保持在1:4传代,细胞扩增较慢,一般在4天左右倍增一次,一定要汇合度达到90%以上再传代。

8、细胞培养过程中,需要每两天弃掉旧的培养基清洗并更换新的培养基,换液频率要维持较高水平,以保证细胞的正常扩增。

 

 

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